RESUMO
Genetically-modified mice without the dopamine transporter (DAT) are hyperdopaminergic, and serve as models for studies of addiction, mania and hyperactive disorders. Here we investigated the capacity for object recognition in mildly hyperdopaminergic mice heterozygous for DAT (DAT +/-), with synaptic dopaminergic levels situated between those shown by DAT -/- homozygous and wild-type (WT) mice. We used a classical dopamine D2 antagonist, haloperidol, to modulate the levels of dopaminergic transmission in a dose-dependent manner, before or after exploring novel objects. In comparison with WT mice, DAT +/- mice showed a deficit in object recognition upon subsequent testing 24h later. This deficit was compensated by a single 0.05mg/kg haloperidol injection 30min before training. In all mice, a 0.3mg/kg haloperidol injected immediately after training impaired object recognition. The results indicate that a mild enhancement of dopaminergic levels can be detrimental to object recognition, and that this deficit can be rescued by a low dose of a D2 dopamine receptor antagonist. This suggests that novel object recognition is optimal at intermediate levels of D2 receptor activity.
Assuntos
Haloperidol/farmacologia , Haloperidol/uso terapêutico , Transtornos da Memória/tratamento farmacológico , Reconhecimento Psicológico/efeitos dos fármacos , Animais , Antagonistas de Dopamina/farmacologia , Antagonistas de Dopamina/uso terapêutico , Proteínas da Membrana Plasmática de Transporte de Dopamina/genética , Proteínas da Membrana Plasmática de Transporte de Dopamina/metabolismo , Relação Dose-Resposta a Droga , Transtornos da Memória/genética , Camundongos , Camundongos Endogâmicos C57BL , Camundongos Transgênicos , Estatísticas não ParamétricasRESUMO
Neste trabalho, novas aplicações de sistemas de expressão de peptídeos heterólogos na superfície bacteriana são descritos, utilizando a proteína de membrana externa de Escherichia coli, LamB, e flagelina. Inserções de epitopos do antígeno imunodominante de Trypanosoma cruzi, JL8, em LamB permitiram o mapeameno da sequência AEKQKAAEATKVAE como o epitopo de célula B imunodominante em soros de pacientes chagásicos através de ensaios de ELISA, representando um método alternativo ao uso de peptídeos sintéticos. Em outra abordagem, a exposição de peptídeos na superfície de E. coli, inseridos em LamB, mostrou-se um sistema versátil para o estudo de interações proteína/receptor in vivo. Bactérias expressando peptídeos derivados da glicoproteína de superfície de T cruzi, gp82, envolvida na invasão da célula hospedeira pelo parasita, inseridos em LamB, foram capazes de aderir a células HeLa. As proteínas de fusão purificadas ligam-se 'as células HeLa e inibem infecção por T cruzi, confirmando a participação dessas sequências na interação parasita/hospedeiro. A expressão de proteínas na superfície bacteriana pode ser empregada no desenvolvimento de vacinas. Neste tipo de abordagem, a flagelina foi utilizada como carregadora de sequências não imunogênicas derivadas da toxina ST de E. coli, responsável por diarréia em crianças e viajantes, com o objetivo de se obter anticorpos neutralizantes. Linhagem atenuada de Salmonella expressando ST inserida na flagelina foi utilizada para apresentar a toxina ST para o sistema imune. Essas linhagens foram também utilizadas como carregadores do DNA para expressão das flagelinas híbridas por células eucarióticas. Bactérias expressando as flagelinas recombinantes induziram fraca ou nenhuma resposta imune contra a toxina ST, após imunização intraperitoneal ou oral, respectivamente. Contudo, imunizações intraperitoneais com as flagelinas híbridas purificadas induzem a produção de anticorpos capazes de neutralizar a atividade da toxina ST, indicando que fusões a flagelina tomam ST imunogênica
